Avl av mutante mus for forskning på leukemi, hematopoiese og immune-medierte sykdommer
1 Formål:
Hematopoiese er dannelsen og utviklingen av blodceller, som starter i beinmargen, og er avhengig av komplekse interaksjoner mellom blodcellene og mikromiljøet. De hvite blodcellene danner immunceller som er kritiske for vårt immunforsvar mot bl.a. infeksjoner, men ved feilregulering (f.eks. pga. mutasjoner, arv og miljø) kan immunsystemet også føre til immun-mediert sykdom, som f.eks. autoimmunitet. Leukemi er kreft som oppstår i umodne blodceller, og er en konsekvens av mutasjoner som aktiverer onkogener og deaktiverer eller hemmer tumor suppressor gener. Formål: Denne søknaden gjelder avl og vedlikehold av mutante musestammer som skal brukes i senere forsøk for studier av leukemi, hematopoiese og immune-medierte sykdommer (beskrives i separate søknader).
2 Skadevirkninger på dyrene: Erfaring med disse dyrestammene tilsier at de fleste har ingen forventede negative helseproblemer i innesluttet miljø. En dyrestamme har innsatt et kjent humant onkogen, men dette er ikke aktivert, og blir kun aktivert etter krysning med en annen transgen (cre) stamme (som ikke vil bli gjort i denne avlsprotokollen). En av dyrestammene har tap av et gen segment som i homozygote avkom fører til nedsatt tumor suppressor funksjon, samt utvikling av autoreaktive antistoffer i blodet. Disse vil kun avles som heterozygote, og homozygote avkom vil avlives ved tegn på sykdom eller ubehag. En av dyrestammene har noen mangler i utviklingen av blodceller, men har av erfaring ingen helseproblemer i innesluttet miljø.
3 Forventet vitenskapelig eller samfunnsmessig nytteverdi: Disse musestammene representerer mutasjoner i gener som er kjent å være viktige regulatorer av hematopoiese, samt viktige tumor suppressor gener og onkogener i human leukemi, og representerer viktige modeller for studier av normal og malign blodcelleutvikling. Disse dyrene vedlikeholdes, avles og krysses for å muliggjøre in vivo forsøk for å forstå mekanismene og samspillet mellom disse genene i blodcelleutviking og i leukemi, og for å kunne finne og teste ut potensielle nye behandlinger.
4 Antall dyr og art: Mutante musestammer med enten stabile (germline) eller regulerbare (conditional, cre-dependent) humane translokasjoner eller mutasjoner i kjente humane onkogener eller tumor suppressor gener, samt transgene musestammer som uttrykker cre-enzymet i spesifikke blodceller vil bli avlet for vedlikehold og for krysninger for å etablere nødvendige kombinerte mutante musestammer. Det søkes om 2566 dyr for å få nok dyr til å vedlikeholde de ulike musestammene i fire år, både som grunnstammer (enkeltmutasjoner) og som kombinerte mutante avlsstammer.
5 Hvordan etterleve 3R: Erstatning, reduksjon og forbedring: Blodcelle utvikling er ikke mulig å oppnå i cellekultur, fordi det krever komplekse interaksjoner mellom de umodne blodcellene (på ulike stadier av utviklingen) og omgivelsene (mikromiljøet). Leukemi er blodkreft som oppstår i umodne blodceller på ulike stadier av blodcelleutviklingen i beinmargen. Dette kan kun oppnås og studeres in vivo, og mus er en vel-etablerte dyremodell for blodcelleutvikling, blodkreft og immunologi. Vi vil redusere antall dyr ved å benytte avkom med korrekt genotype (heterozygot) til nye generasjoner avlsdyr. Videre utfører vi in vitro forsøk for å kartlegge mekanismer og definere spesifikke mål for in vivo forsøkene, for derved å kunne forbedre senere forsøk og redusere antall dyr for senere in vivo forsøk.
Hematopoiese er dannelsen og utviklingen av blodceller, som starter i beinmargen, og er avhengig av komplekse interaksjoner mellom blodcellene og mikromiljøet. De hvite blodcellene danner immunceller som er kritiske for vårt immunforsvar mot bl.a. infeksjoner, men ved feilregulering (f.eks. pga. mutasjoner, arv og miljø) kan immunsystemet også føre til immun-mediert sykdom, som f.eks. autoimmunitet. Leukemi er kreft som oppstår i umodne blodceller, og er en konsekvens av mutasjoner som aktiverer onkogener og deaktiverer eller hemmer tumor suppressor gener. Formål: Denne søknaden gjelder avl og vedlikehold av mutante musestammer som skal brukes i senere forsøk for studier av leukemi, hematopoiese og immune-medierte sykdommer (beskrives i separate søknader).
2 Skadevirkninger på dyrene: Erfaring med disse dyrestammene tilsier at de fleste har ingen forventede negative helseproblemer i innesluttet miljø. En dyrestamme har innsatt et kjent humant onkogen, men dette er ikke aktivert, og blir kun aktivert etter krysning med en annen transgen (cre) stamme (som ikke vil bli gjort i denne avlsprotokollen). En av dyrestammene har tap av et gen segment som i homozygote avkom fører til nedsatt tumor suppressor funksjon, samt utvikling av autoreaktive antistoffer i blodet. Disse vil kun avles som heterozygote, og homozygote avkom vil avlives ved tegn på sykdom eller ubehag. En av dyrestammene har noen mangler i utviklingen av blodceller, men har av erfaring ingen helseproblemer i innesluttet miljø.
3 Forventet vitenskapelig eller samfunnsmessig nytteverdi: Disse musestammene representerer mutasjoner i gener som er kjent å være viktige regulatorer av hematopoiese, samt viktige tumor suppressor gener og onkogener i human leukemi, og representerer viktige modeller for studier av normal og malign blodcelleutvikling. Disse dyrene vedlikeholdes, avles og krysses for å muliggjøre in vivo forsøk for å forstå mekanismene og samspillet mellom disse genene i blodcelleutviking og i leukemi, og for å kunne finne og teste ut potensielle nye behandlinger.
4 Antall dyr og art: Mutante musestammer med enten stabile (germline) eller regulerbare (conditional, cre-dependent) humane translokasjoner eller mutasjoner i kjente humane onkogener eller tumor suppressor gener, samt transgene musestammer som uttrykker cre-enzymet i spesifikke blodceller vil bli avlet for vedlikehold og for krysninger for å etablere nødvendige kombinerte mutante musestammer. Det søkes om 2566 dyr for å få nok dyr til å vedlikeholde de ulike musestammene i fire år, både som grunnstammer (enkeltmutasjoner) og som kombinerte mutante avlsstammer.
5 Hvordan etterleve 3R: Erstatning, reduksjon og forbedring: Blodcelle utvikling er ikke mulig å oppnå i cellekultur, fordi det krever komplekse interaksjoner mellom de umodne blodcellene (på ulike stadier av utviklingen) og omgivelsene (mikromiljøet). Leukemi er blodkreft som oppstår i umodne blodceller på ulike stadier av blodcelleutviklingen i beinmargen. Dette kan kun oppnås og studeres in vivo, og mus er en vel-etablerte dyremodell for blodcelleutvikling, blodkreft og immunologi. Vi vil redusere antall dyr ved å benytte avkom med korrekt genotype (heterozygot) til nye generasjoner avlsdyr. Videre utfører vi in vitro forsøk for å kartlegge mekanismer og definere spesifikke mål for in vivo forsøkene, for derved å kunne forbedre senere forsøk og redusere antall dyr for senere in vivo forsøk.