Genredigering av kandidatgener for økt motstand mot cardiomyopatisyndrom
Cardiomyopatisyndrom er en sykdom hos laks som forårsaker store økonomiske tap og reduserer veldferden til oppdrettslaks i Norge. Tidligere studier har identifisert områder i genomet som inneholder gener som ser ut til å påvirke CMS resistens. I dette forsøket ønsker vi å verifisere om et kandidatgen for CMS resistens, class I histocompatibility antigen, F10 alpha chain-like (ha1f), er involvert i motstand mot sykdommen ved å slå ut genet ved CRISPR-Cas teknologi og deretter gjennomføre et smitteforsøk med piscint myocardittvirus (PMCV).
Genotypen med ikke-funksjonelt ha1f er identifisert i MOWIs laksepopulasjon, og genredigering av dette genet forventes ikke å gi skadevirkning hos laksen, med unntak av potensielt redusert sykdomsmotstand.
PMCV infeksjon er karakterisert ved betennelse og nekrose i forkammer og i spongiøs muskulatur i hjertekammeret. Det kan sees histopatologiske endringer i lever og milt, sannsynligvis som et resultat av sirkulasjonssvikten som hjerteendringene utløser.
Økt kunnskap om gener involvert i motstand mot CMS kan benyttes i avlsprogram og bidra til
økt sykdomsresistens i laks. Dette kan gi økt fiskevelferd og forbedre bioøkonomien og bærekraften i produksjonen av atlantisk laks.
I dette forsøket vil benytte 1850 forsøksdyr. I det første forsøket som måtte avsluttes pga høy dødelighet ble det benyttet 489 laks. Det søkes om å flytte FOTS godkjenningen til Nofima sin forsøksstasjon på Sunndalsøra for å gjenta forsøket og dermed også forlenge forsøksperioden fram til 31.12.26.
Vi vil benytte in vitro cellelinjer fra laks for å teste CRISPR/Cas konstrukter for å redusere bruk av lakseegg. In vitro studier kan ikke erstatte fiskeforsøkene fullstendig fordi vi ønsker å se hvordan ha1f genet påvirker laksens motstand mot CMS.
Fisken vil overvåkes daglig, og nøye etter smitte. Tiltak for å redusere stress vil bli gjennomført.
Fisk som viser kliniske tegn til sykdom (redusert svømmeaktivitet/manglende fôropptak over mer enn 2 dager) vil bli avlivet.
Genotypen med ikke-funksjonelt ha1f er identifisert i MOWIs laksepopulasjon, og genredigering av dette genet forventes ikke å gi skadevirkning hos laksen, med unntak av potensielt redusert sykdomsmotstand.
PMCV infeksjon er karakterisert ved betennelse og nekrose i forkammer og i spongiøs muskulatur i hjertekammeret. Det kan sees histopatologiske endringer i lever og milt, sannsynligvis som et resultat av sirkulasjonssvikten som hjerteendringene utløser.
Økt kunnskap om gener involvert i motstand mot CMS kan benyttes i avlsprogram og bidra til
økt sykdomsresistens i laks. Dette kan gi økt fiskevelferd og forbedre bioøkonomien og bærekraften i produksjonen av atlantisk laks.
I dette forsøket vil benytte 1850 forsøksdyr. I det første forsøket som måtte avsluttes pga høy dødelighet ble det benyttet 489 laks. Det søkes om å flytte FOTS godkjenningen til Nofima sin forsøksstasjon på Sunndalsøra for å gjenta forsøket og dermed også forlenge forsøksperioden fram til 31.12.26.
Vi vil benytte in vitro cellelinjer fra laks for å teste CRISPR/Cas konstrukter for å redusere bruk av lakseegg. In vitro studier kan ikke erstatte fiskeforsøkene fullstendig fordi vi ønsker å se hvordan ha1f genet påvirker laksens motstand mot CMS.
Fisken vil overvåkes daglig, og nøye etter smitte. Tiltak for å redusere stress vil bli gjennomført.
Fisk som viser kliniske tegn til sykdom (redusert svømmeaktivitet/manglende fôropptak over mer enn 2 dager) vil bli avlivet.