Challenge and vaccination against tilapia lake virus infection in target species and model fish
Tilapia lake virus (TiLV) er et relativt nylig påvist virus som infiserer tilapia og som gir høy dødelighet gjennom hele produksjonssyklus, særlig i de tidlige faser av produksjonen. Det er utført eksperimentell smitte med TiLV i målarten (target species) i flere laboratorier i Asia, men ikke i modellfisk. Det er gjort noen få studert på hvorvidt TiLV infiserer andre arter, men ikke i modell-arter som zebrafisk. Det er mange fordeler med å bruke en modellart som zebrafisk; det er mye mer informasjon om fisken genom sammenlignet med tilapia, antall molekyler som er karakterisert og tilgjengelig for estimering av transkriptnivå overstiger langt hva som er tilgjengelig for tilapia. Dette bidrar til bedre karakterisering av vertens respons på infeksjon og på vaksinasjon og muliggjør at man raskere kan komme fram til vaksineformuleringer og leveringsmetoder som gir beskyttelse. Sammenlignende studier med zebrafisk og tilapia med samme smitteisolat muliggjør direkte sammenligninger under like betingelser.
Målet med denne studien er å sammenligne eksperimentell smitte med TiLV i tilapia og zebrafisk, og teste ut vaksiner som potensielt kan gi beskyttelse mot infeksjon/sykdom. Hvorvidt smitte gir dødelighet hos zebrafisk er ikke vist eller kjent.
Forsøket gjennomføres som et sammenlignende vaksinasjons- og smitteforsøk i zebrafisk og tilapia, først i tilapia for å sikre at virus er virulent/sykdomsframkallende. Det inngår 120 zebrafisk og 290 tilapia i to delforsøk. En vaksine mot TiLV vil redusere forekomst og død av sykdommen. Det er foretatt en beregning av antall individer som vil være nødvendig å inkludere pr gruppe for hvert uttak (power-analyse) og vi har modellert hvordan antall dyr og krav om testens styrke påvirkes av antall individer i de ulike gruppene. Humane endepunkter ivaretas ved nøye klinisk observasjon i etterkant av smitte som endret eller redusert fôropptak, endret svømmeadferd, oppblåst buk, endret farge på fisken, eller sløvhet. Fisken som viser symptomer vil bli tatt ut av karet og avlivet med en overdose anestesimiddel.
Målet med denne studien er å sammenligne eksperimentell smitte med TiLV i tilapia og zebrafisk, og teste ut vaksiner som potensielt kan gi beskyttelse mot infeksjon/sykdom. Hvorvidt smitte gir dødelighet hos zebrafisk er ikke vist eller kjent.
Forsøket gjennomføres som et sammenlignende vaksinasjons- og smitteforsøk i zebrafisk og tilapia, først i tilapia for å sikre at virus er virulent/sykdomsframkallende. Det inngår 120 zebrafisk og 290 tilapia i to delforsøk. En vaksine mot TiLV vil redusere forekomst og død av sykdommen. Det er foretatt en beregning av antall individer som vil være nødvendig å inkludere pr gruppe for hvert uttak (power-analyse) og vi har modellert hvordan antall dyr og krav om testens styrke påvirkes av antall individer i de ulike gruppene. Humane endepunkter ivaretas ved nøye klinisk observasjon i etterkant av smitte som endret eller redusert fôropptak, endret svømmeadferd, oppblåst buk, endret farge på fisken, eller sløvhet. Fisken som viser symptomer vil bli tatt ut av karet og avlivet med en overdose anestesimiddel.
Etterevaluering
Betydelig belastende
Begrunnelse for etterevalueringen
Studien har gitt et godt grunnlag for å vurdere effekt av ulike vaksineringsmetoder mot TiLV infeksjon hos tilapia. Det er vist at tilapia etablerer en god immunrespons etter vaksinasjon med vaksine som gir beskyttende immunitet mot letal smitte.
Det ble benyttet 120 zebrafisk og 280 tilapia. Forsøket gav en belastningsgrad som beskrevet i søknaden og fisk ble humant avlivet ved påvisning av kliniske symptomer etter smitte. Det var derfor liten eller ingen dødelighet i forsøket.
Forbedrede metoder for evaluering av belastning og objektive målemetoder for å klassifisere og håndtere ulike typer av kliniske reaksjoner på infeksjon, bør alltid være et fokus innen eksperimentelle studier. Det vil også være viktig å finne fram til pålitelige og gode/prediktive måter å evaluere kliniske symptomer på, særlig hos fisk, og dermed også finne fram til gode, pålitelige og reproduserbare humane endepunkter. I dette forsøket ble det ikke oppdaget store forbedringspunkter mhp etterlevelse av 3R.
Det ble benyttet 120 zebrafisk og 280 tilapia. Forsøket gav en belastningsgrad som beskrevet i søknaden og fisk ble humant avlivet ved påvisning av kliniske symptomer etter smitte. Det var derfor liten eller ingen dødelighet i forsøket.
Forbedrede metoder for evaluering av belastning og objektive målemetoder for å klassifisere og håndtere ulike typer av kliniske reaksjoner på infeksjon, bør alltid være et fokus innen eksperimentelle studier. Det vil også være viktig å finne fram til pålitelige og gode/prediktive måter å evaluere kliniske symptomer på, særlig hos fisk, og dermed også finne fram til gode, pålitelige og reproduserbare humane endepunkter. I dette forsøket ble det ikke oppdaget store forbedringspunkter mhp etterlevelse av 3R.