Effect of temperature and pH on gametic information in zebrafish
1 Purpose
The purpose of this experiment is to determine how the alterations in water temperature and pH affect the epigenetic information contained in gametes and/or future embryos.
2 Distress
Fish will be subjected temporarily to altered temperature (lower or higher than normal) or pH (lower or higher than normal). In pre-trials, the pH and temperature limits have to be established to determine safe (non-lethal) ranges.
3 Expected benefit
Novel information on the effect of environmental modulation on gametic and embryonic epigenetic information.
4 Number of animals, and what kind
Adult zebrafish, and freshly produced embryos of zebrafish of reference strains (AB and NGRH1). For pre-trials: c. 200 fish. For the exact experiments: c. 320 fish.
5 How to adhere to 3R
The sufficient minimum number of fish will be used for pre-trials (n=5 per sex per treatment; 10 groups in duplicate). For exact experiments, c. 20 fish per treatment (8 groups in duplicate) will be used, equally males and females, to secure appropriate gamete production. There is no computational or cell culture alternative to approach the research question.
The purpose of this experiment is to determine how the alterations in water temperature and pH affect the epigenetic information contained in gametes and/or future embryos.
2 Distress
Fish will be subjected temporarily to altered temperature (lower or higher than normal) or pH (lower or higher than normal). In pre-trials, the pH and temperature limits have to be established to determine safe (non-lethal) ranges.
3 Expected benefit
Novel information on the effect of environmental modulation on gametic and embryonic epigenetic information.
4 Number of animals, and what kind
Adult zebrafish, and freshly produced embryos of zebrafish of reference strains (AB and NGRH1). For pre-trials: c. 200 fish. For the exact experiments: c. 320 fish.
5 How to adhere to 3R
The sufficient minimum number of fish will be used for pre-trials (n=5 per sex per treatment; 10 groups in duplicate). For exact experiments, c. 20 fish per treatment (8 groups in duplicate) will be used, equally males and females, to secure appropriate gamete production. There is no computational or cell culture alternative to approach the research question.
Etterevaluering
All projects involving severe procedures must be retrospectively assessed by the Norwegian Food Safety Authority.
Begrunnelse for etterevalueringen
Forsøket ble gjennomført i perioden 26.06 2019 til 1.08.2021 og var en del av et PhD-prosjekt. På grunn av at analysearbeidet tok lang tid, ble siste frist for innsending av informasjon for Mattilsynets etterevaluering satt til 15. juni 2022. På dette tidspunktet var likevel ikke analysene av data fra forsøket klare.
Forsøksansvarlig mente likevel at de foreløpige resultatene indikerte at den termiske påvirkningen på kjønnsmodne sebrafisk-hunner kunne endre visse undergrupper av små kjernesyrer (RNA) i eggene. For å undersøke dette funnet nærmere måtte det imidlertid gjennomføres flere analyser.
Kun 152 av 350 godkjente dyr ble benyttet. Forsøksansvarlig begrunner dette med at gjennomføringen av alle deler av forsøket var vellykket og at behovet for antall dyr derfor ble redusert. Dette ga forskerne det laveste antallet observasjoner som var nødvendig for å få sikre resultater.
Det ble ikke observert dødelighet i forsøket og forsøksansvarlig vurderte belastningen på dyrene som moderat. Forsøksansvarlig legger vekt på den velferdsmessige betydningen av sedasjon før serbrafisk avlives med en overdose av anestesimiddel.
Målet med forsøket var å bestemme hvordan endringene i vanntemperatur og pH påvirker den epigenetiske informasjonen som finnes i kjønnsceller og/eller fremtidige embryoer hos sebrafisk. På grunn av manglende resultater er det vanskelig for Mattilsynet å vurdere om målet i forsøket ble oppfylt.
Forsøksansvarlig mente likevel at de foreløpige resultatene indikerte at den termiske påvirkningen på kjønnsmodne sebrafisk-hunner kunne endre visse undergrupper av små kjernesyrer (RNA) i eggene. For å undersøke dette funnet nærmere måtte det imidlertid gjennomføres flere analyser.
Kun 152 av 350 godkjente dyr ble benyttet. Forsøksansvarlig begrunner dette med at gjennomføringen av alle deler av forsøket var vellykket og at behovet for antall dyr derfor ble redusert. Dette ga forskerne det laveste antallet observasjoner som var nødvendig for å få sikre resultater.
Det ble ikke observert dødelighet i forsøket og forsøksansvarlig vurderte belastningen på dyrene som moderat. Forsøksansvarlig legger vekt på den velferdsmessige betydningen av sedasjon før serbrafisk avlives med en overdose av anestesimiddel.
Målet med forsøket var å bestemme hvordan endringene i vanntemperatur og pH påvirker den epigenetiske informasjonen som finnes i kjønnsceller og/eller fremtidige embryoer hos sebrafisk. På grunn av manglende resultater er det vanskelig for Mattilsynet å vurdere om målet i forsøket ble oppfylt.