Endring: Sammenlikning av beskyttelse fra attenuerte versus inaktiverte vaksiner mot HSMB -Korttidsbeskyttelse (copy)
Dette er samme forsøksplan som tidligere sendt med samme tittel , men REDUSERT (færre dyr, kortere varighet)
Dette forsøket er en del av det NFR-finansierte prosjektet ViVaAct #280847.
Studiens formål er å sammenlikne immunisering med inaktivert Piscint orthoreovirus (PRV) og med attenuerte varianter av PRV, vurdere beskyttelse mot den PRV-medierte sykdommen hjerte- og skjelettmuskelbetennelse (HSMB), og karakterisere forskjeller i spesifikk immunrespons.
HSMB er en av de mest utbredte virussykdommene i Norsk lakseoppdrett, med mer enn 100 utbrudd rapportert årlig. Sykdomsmortaliteten kan komme opp i 20%. Viruset gjør også at fisken blir mer sensitiv for stress. I tillegg utvikler viruset persistens i oppdrettsfisk slik at rundt 90% av fisken blir PRV-positiv etter noen måneder i sjø, og forblir viruspositiv fram til slakt. Spredning av virulent PRV til villfiskbestanden er også en relevant problemstilling. Prosjektgruppen (søker) har nylig vist at både inaktiverte PRV-partikler og en DNA vaksine mot PRV kan gi delvis, men ikke fullstendig beskyttelse mot HSMB i fisk som smittes "naturlig" via vann. Forsøket det her søkes om skal avklare om en attenuert virusvaksine er veien til fullstendig beskyttelse mot HSMB, og resultatet kan derfor ha stor samfunnsmessig nytteverdi. Forsøkene vil også gi økt vitenskapelig kunnskap om de mest funksjonelle beskyttelsesmekanismene ved vaksinering.
I forsøket skal det benyttes 630 Atlantiske laks med startvekt på rundt 40g, fordelt på 6 initielle forsøksgrupper. Laksen i gruppe 2-3 vil bli immunisert ved intraperitonal injeksjon med attenuerte eller avirulente virusvarianter som ikke forventes å gi noen sykdom i Atlantisk laks (tidligere vist for 2 av 3).Virulent PRV-kontroll (Gruppe 1, forventer utvikling av HSMB, men ingen dødelighet), inaktivert PRV vaksine-kontroll (Gr 4, ingen sykdom forventes), eller negativ kontroll (Gr 5, ingen sykdom forventes). 5 uker ut i forløpet tilsettes virulent kontrollgruppe 1 og attenuerte grupper 2-3 15 ekstra naive fisk som kontroll på om de enda shedder virus. Disse prøvetas uke 8 og 10. Ingen sykdom forventes i perioden. Etter åtte uker injiseres fisk i gruppe 6 med virulent PRV (Shedderfisk,forventer utvikling av HSMB, men ingen dødelighet). Uke 10 splittes gruppe 5 i to kar (a+b) og vaksinegruppene 1-4 pluss 5b smittes med 1:1-forhold med infisert shedderfisk. Shedderfisken tas ut av karet igjen i uke 12 og det tappes blod for oppsamling av virusmateriale. Fisken som smittes via sheddere vil også kunne utvikle HSMB-typiske betennelsesskader i hjertet, men det forventes ikke mortalitet. Forsøket avsluttes etter 18 uker.
Det finnes i dag ikke in vitro modeller som kan erstatte fisk for å få svar på spørsmålet om optimal beskyttelse ved vaksinering. Vi har imidlertid minimalisert antall prøveuttak og unngått parallellkar for å redusere antall fisk i forsøket, og vi gjør et maksimum av analyser på hver fisk. Fisken håndteres skånsomt under anestesi ved vaksinering og smitte, og avlives med overdose anestesi før prøvetagning. Humant endepunkt i forsøket er kliniske tegn på sykdom og moribund fisk.
Dette forsøket er en del av det NFR-finansierte prosjektet ViVaAct #280847.
Studiens formål er å sammenlikne immunisering med inaktivert Piscint orthoreovirus (PRV) og med attenuerte varianter av PRV, vurdere beskyttelse mot den PRV-medierte sykdommen hjerte- og skjelettmuskelbetennelse (HSMB), og karakterisere forskjeller i spesifikk immunrespons.
HSMB er en av de mest utbredte virussykdommene i Norsk lakseoppdrett, med mer enn 100 utbrudd rapportert årlig. Sykdomsmortaliteten kan komme opp i 20%. Viruset gjør også at fisken blir mer sensitiv for stress. I tillegg utvikler viruset persistens i oppdrettsfisk slik at rundt 90% av fisken blir PRV-positiv etter noen måneder i sjø, og forblir viruspositiv fram til slakt. Spredning av virulent PRV til villfiskbestanden er også en relevant problemstilling. Prosjektgruppen (søker) har nylig vist at både inaktiverte PRV-partikler og en DNA vaksine mot PRV kan gi delvis, men ikke fullstendig beskyttelse mot HSMB i fisk som smittes "naturlig" via vann. Forsøket det her søkes om skal avklare om en attenuert virusvaksine er veien til fullstendig beskyttelse mot HSMB, og resultatet kan derfor ha stor samfunnsmessig nytteverdi. Forsøkene vil også gi økt vitenskapelig kunnskap om de mest funksjonelle beskyttelsesmekanismene ved vaksinering.
I forsøket skal det benyttes 630 Atlantiske laks med startvekt på rundt 40g, fordelt på 6 initielle forsøksgrupper. Laksen i gruppe 2-3 vil bli immunisert ved intraperitonal injeksjon med attenuerte eller avirulente virusvarianter som ikke forventes å gi noen sykdom i Atlantisk laks (tidligere vist for 2 av 3).Virulent PRV-kontroll (Gruppe 1, forventer utvikling av HSMB, men ingen dødelighet), inaktivert PRV vaksine-kontroll (Gr 4, ingen sykdom forventes), eller negativ kontroll (Gr 5, ingen sykdom forventes). 5 uker ut i forløpet tilsettes virulent kontrollgruppe 1 og attenuerte grupper 2-3 15 ekstra naive fisk som kontroll på om de enda shedder virus. Disse prøvetas uke 8 og 10. Ingen sykdom forventes i perioden. Etter åtte uker injiseres fisk i gruppe 6 med virulent PRV (Shedderfisk,forventer utvikling av HSMB, men ingen dødelighet). Uke 10 splittes gruppe 5 i to kar (a+b) og vaksinegruppene 1-4 pluss 5b smittes med 1:1-forhold med infisert shedderfisk. Shedderfisken tas ut av karet igjen i uke 12 og det tappes blod for oppsamling av virusmateriale. Fisken som smittes via sheddere vil også kunne utvikle HSMB-typiske betennelsesskader i hjertet, men det forventes ikke mortalitet. Forsøket avsluttes etter 18 uker.
Det finnes i dag ikke in vitro modeller som kan erstatte fisk for å få svar på spørsmålet om optimal beskyttelse ved vaksinering. Vi har imidlertid minimalisert antall prøveuttak og unngått parallellkar for å redusere antall fisk i forsøket, og vi gjør et maksimum av analyser på hver fisk. Fisken håndteres skånsomt under anestesi ved vaksinering og smitte, og avlives med overdose anestesi før prøvetagning. Humant endepunkt i forsøket er kliniske tegn på sykdom og moribund fisk.