Funksjon av nye petider ved hjertesvikt
Bakgrunn og formål
Hjertesvikt er den vanligste dødsårsaken i den vestlige verden. Pasienter med hjertesvikt har en dårlig prognose selv ved optimal medikamentell behandling. For å utvikle nye og bedre behandlingstilbud er det essensielt å forstå bakgrunnen og mekanismene som ligger til grunn for hjertesvikt. Protein X er opprinnelig karakterisert som et nevroprotein og har viktige effekter i hjernen. Tidligere har man antatt at dette proteinet kun eksisterte i nerveceller, men nyere forskning har vist at protein X også opptrer i andre celle- og vevstyper.
Patofysiologien for protein X ved hjertesvikt er foreløpig ikke kjent. Vi har utført en rekke forsøk med protein X som vi her ønsker å videreføre (FOTS id 6178). Resultatene våre viser at protein X finnes i hjertet, og at nivåer av dette proteinet oppreguleres ved hjertesvikt i dyremodeller. Vi har protein X knock-out (KO) mus som vi har som vi har utført aorta banding-inngrep for å studere effekten av proteinet ved hjertesvikt. Vi fant økt kortidsmortalitet hos protein X KO mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi. Vi ønsker å studere hva som er grunnen for tidlig død hos protein X KO mus. Vi har også studert isolerte hjerteceller fra protein X mus og funnet at kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsium lekkasje, og vi har sett at nivåer av noen ionekanaler er regulert hos protein X KO mus. Her ønsker vi å undersøke hva mekanismen for dette er og om dette har sammenheng med kortidsmortalitet hos protein X mus. Våre funn så langt indikerer at protein X spiller en sentral rolle i hjertet og vi ønsker å kartlegge dette videre. Dette prosjektet kan gi økt forståelse for hva som går galt i hjertet ved arytmi og plutselig død. Det kan også ha et terapeutisk potensiale og gi forbedret grunnlag for fremtidig pasientbehandling.
Metode
Dette prosjektet er nå i sluttfasen og vi ønsker å verifisere resultat vi har fra forsøk i cellelinjer med isolerte kardiomyocytter. Vi ønsker også å protein X KO mus dør av arytmi ved å utføre telemetri måling.
Hjertesvikt er den vanligste dødsårsaken i den vestlige verden. Pasienter med hjertesvikt har en dårlig prognose selv ved optimal medikamentell behandling. For å utvikle nye og bedre behandlingstilbud er det essensielt å forstå bakgrunnen og mekanismene som ligger til grunn for hjertesvikt. Protein X er opprinnelig karakterisert som et nevroprotein og har viktige effekter i hjernen. Tidligere har man antatt at dette proteinet kun eksisterte i nerveceller, men nyere forskning har vist at protein X også opptrer i andre celle- og vevstyper.
Patofysiologien for protein X ved hjertesvikt er foreløpig ikke kjent. Vi har utført en rekke forsøk med protein X som vi her ønsker å videreføre (FOTS id 6178). Resultatene våre viser at protein X finnes i hjertet, og at nivåer av dette proteinet oppreguleres ved hjertesvikt i dyremodeller. Vi har protein X knock-out (KO) mus som vi har som vi har utført aorta banding-inngrep for å studere effekten av proteinet ved hjertesvikt. Vi fant økt kortidsmortalitet hos protein X KO mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi. Vi ønsker å studere hva som er grunnen for tidlig død hos protein X KO mus. Vi har også studert isolerte hjerteceller fra protein X mus og funnet at kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsium lekkasje, og vi har sett at nivåer av noen ionekanaler er regulert hos protein X KO mus. Her ønsker vi å undersøke hva mekanismen for dette er og om dette har sammenheng med kortidsmortalitet hos protein X mus. Våre funn så langt indikerer at protein X spiller en sentral rolle i hjertet og vi ønsker å kartlegge dette videre. Dette prosjektet kan gi økt forståelse for hva som går galt i hjertet ved arytmi og plutselig død. Det kan også ha et terapeutisk potensiale og gi forbedret grunnlag for fremtidig pasientbehandling.
Metode
Dette prosjektet er nå i sluttfasen og vi ønsker å verifisere resultat vi har fra forsøk i cellelinjer med isolerte kardiomyocytter. Vi ønsker også å protein X KO mus dør av arytmi ved å utføre telemetri måling.
Etterevaluering
Grunnet den samlete belastningen på dyrene er forsøket klassifisert som betydelig belastende, jf. forsøksdyrforskriften vedlegg B.
Forsøket skal evalueres i etterkant, jf. Instruks for Mattilsynets forvaltning av forsøksdyrforskriften 30. juni 2015 § 13.
Forsøket skal evalueres i etterkant, jf. Instruks for Mattilsynets forvaltning av forsøksdyrforskriften 30. juni 2015 § 13.
Begrunnelse for etterevalueringen
Formålet med dette forsøket har vært å skaffe mer kunnskap om protein X og hvilken rolle det spiller i utvikling av hjertesvikt.
De forsøksansvarlige har undersøkt overlevelse i protein X KO- mus sammenlignet med kontroller etter aorta banding.
Formålet for forsøkene ble i stor grad oppnådd. De forsøksansvarlige har utført aorta banding-inngrep og sett på overlevelse, lokalisering og funksjon i vev og celler, samt tendens for arytmi i isolerte hjerter.
Det ble funnet økt korttidsmortalitet hos protein X KO- mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi.
Kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsiumlekkasje i en blandet bakgrunn av protein X KO- mus.
En mulig forklaring for tidlig død er ventrikulære arytmier, og patofysiologien her kan involvere transport gjennom ionekanaler.
Det er rapportert bruk av 965 mus i forsøket. Det var gitt tillatelse til bruk av 1173 mus til avl og forsøk.
Klassifisering som betydelig belastende er benyttet for mus som har gjennomgått aorta banding eller som har blitt sham-operert.
Det korrekte tallet her er 66 mus.
Det ble gjort en feil i rapporteringen for 2021, da 174 mus ble rapportert inn som betydelig belastende.
Det riktige tallet for 2021 er 18 mus.
De andre musene ble ikke inkludert i forsøkene, men ble avlivet som overskuddsdyr.
Målet om telemetri ble ikke oppnådd, da denne delen av forsøket ble utført i isolerte hjerter i stedet for å operere inn telemetrisendere. Dette var for å bruke færrest mulig dyr for å først teste om hypotesen var riktig. Telemetrimålinger kan bli aktuelt, men det er ikke bestemt ennå.
3R:
Det finnes ikke aktuelle simuleringsprogrammer for mekanismene ved hjertesvikt som de forsøksansvarlige ønsket å undersøke i forsøket.
De forsøksansvarlige har forbedret studien ved å erstatte in vivo forsøk med ex vivo der det lot seg gjøre. Det er brukt raffinerte metoder, utført av erfarent personell.
Prosedyrene er optimalisert over mange år slik at dødeligheten er minimal.
Det er bare brukt hannmus i forsøket, noe som kan revurderes i evt. fremtidige forsøk. Da ville flere dyr måtte inkluderes med tanke på statistiske analyser, men færre dyr ville blitt avlivet som overskuddsdyr.
Musene ble tett overvåket, og musene som utviklet sykdom ble avlivet før de ble veldig dårlige.
Alle musene ble inkludert i studien og høstet vev fra.
Forsøket kan avsluttes tidligere i evt. fremtidige forsøk der man ikke studerer overlevelse.
De forsøksansvarlige har undersøkt overlevelse i protein X KO- mus sammenlignet med kontroller etter aorta banding.
Formålet for forsøkene ble i stor grad oppnådd. De forsøksansvarlige har utført aorta banding-inngrep og sett på overlevelse, lokalisering og funksjon i vev og celler, samt tendens for arytmi i isolerte hjerter.
Det ble funnet økt korttidsmortalitet hos protein X KO- mus, men ingen forandring av hjertets funksjon med ekkokardiografi.
Kalsiumhåndteringen er dysfunksjonell med økt kalsiumlekkasje i en blandet bakgrunn av protein X KO- mus.
En mulig forklaring for tidlig død er ventrikulære arytmier, og patofysiologien her kan involvere transport gjennom ionekanaler.
Det er rapportert bruk av 965 mus i forsøket. Det var gitt tillatelse til bruk av 1173 mus til avl og forsøk.
Klassifisering som betydelig belastende er benyttet for mus som har gjennomgått aorta banding eller som har blitt sham-operert.
Det korrekte tallet her er 66 mus.
Det ble gjort en feil i rapporteringen for 2021, da 174 mus ble rapportert inn som betydelig belastende.
Det riktige tallet for 2021 er 18 mus.
De andre musene ble ikke inkludert i forsøkene, men ble avlivet som overskuddsdyr.
Målet om telemetri ble ikke oppnådd, da denne delen av forsøket ble utført i isolerte hjerter i stedet for å operere inn telemetrisendere. Dette var for å bruke færrest mulig dyr for å først teste om hypotesen var riktig. Telemetrimålinger kan bli aktuelt, men det er ikke bestemt ennå.
3R:
Det finnes ikke aktuelle simuleringsprogrammer for mekanismene ved hjertesvikt som de forsøksansvarlige ønsket å undersøke i forsøket.
De forsøksansvarlige har forbedret studien ved å erstatte in vivo forsøk med ex vivo der det lot seg gjøre. Det er brukt raffinerte metoder, utført av erfarent personell.
Prosedyrene er optimalisert over mange år slik at dødeligheten er minimal.
Det er bare brukt hannmus i forsøket, noe som kan revurderes i evt. fremtidige forsøk. Da ville flere dyr måtte inkluderes med tanke på statistiske analyser, men færre dyr ville blitt avlivet som overskuddsdyr.
Musene ble tett overvåket, og musene som utviklet sykdom ble avlivet før de ble veldig dårlige.
Alle musene ble inkludert i studien og høstet vev fra.
Forsøket kan avsluttes tidligere i evt. fremtidige forsøk der man ikke studerer overlevelse.