PCI av rekombinante gelonin-basserte immunotoksiner
Målrettede toksiner (immunotoksiner) har stort potensiale for behandling av kreft. Den kliniske bruken av immunotoksiner i kreftbehandling har, imidlertid, vært begrenset blant annet av toksisitet og utvikling av antistoffer mot legemiddelet. Vi har de siste årene dokumentert at disse begrensningene kan bli møtt ved hjelp av en teknologi for legemiddellevering, nærmere bestemt fotokjemisk internalisering (PCI). PCI er av oss og andre vist å øke effekten av gelonin-basserte immunotoksiner synergistisk i flere modeller i dyr, og vi ønsker nå å utvikle denne metoden videre for klinisk bruk. Den senere tid har vi etablet et laboratorium for produksjon av rekombinante immunotoksiner med høy renhet. Våre immunotoksiner er løst i PBS og de er både endotoksin-frie og sterile og derfor egnet for in vivo administrering. Vi jobber nå hovedsakelig med 3 forskjellige immunotoksiner rettet mot både tumorens parenkyme celler og tumorens vaskulatur. Dette prosjektet har som målsetning å teste effekten av disse tre immunotoksinene i kombinasjon med PCI in vivo.
Bassert på tidligere erfaringer med PCI in vivo (f.eks FOTS nr 4902, 5028 og 7096) forventer vi små til moderate belastinger på dyrene. Vi forventer hevelse og ødemer i lysbehandlet område de første 3-6 dagene etter behandling. Bassert på resultatene fra FODS nr 4902 kan noen av de PCI behandlede dyrene(1/3 i FODS nr 4902) få små overfladiske sår i lysbehandlet område. Disse sårene er i andre modeller observert å heles innen 2 uker uten arrdannelse. Både hevelse, ødemer og sårdannelse er en naturlig konsekvens av PCI behandlingen, og observeres også i pasienter behandlet med PCI.
Dette prosjektet har potensiell svært stor nytteverdi både vitenskapelig og samfunnsmessig da det evaluerer en ny metode for kreftbehandling.
Vi ønsker å benytte inntil 750 mus (400 Atymic Nude-Foxn1nu hunn mus og 350 Balb/c).
Dette prosjektet er designet for å etterleve kravene til 3R. PCI av de aktuelle immunotoksinene blir først nøye testet og evaluert in vitro, og vi går kun videre med de prosedyrene som gir gode resultater in vitro. Ettersom dette er en behandlingsstrategi vi mener kan utvikles for behandling av menneske, er det etter in vitro evaluering viktig å gjøre forsøkene i levende dyr, for å se om behandlingen også er effektiv i et komplekst in vivo system. Antall mus i hver behandlingsgruppe er bestemt til et minimum for å gi akseptabel statistikk på bakgrunn av tilsvarende effekt studier med PCI (FODS nr 4902, 5028 og 7096). Forsøket er designet med forskjellige protokoller i forskjellige modeller, men vil initielt gjøres i 1 model og eventuelt reporoduseres i de resterende. Forsøkene gjøres initielt med A-431 eller CT26 modellen avhenging av hvilket immunotoksin som testes og reproduseres eventuelt i SCC026 og SCCO40 modellene som skisert. For studier med checkpoint inhibitorer vil MC38 modellen benyttes i tillegg til CT26. Dyrene vil bli lagt under anestesi under behandlingen og vil bli tett overvåket både før, under og etter behandling. Endepunktet (tumorvolum) er satt relativt lavt (1000 mm3) for å hindre unødvendig belasting på dyrene.
Bassert på tidligere erfaringer med PCI in vivo (f.eks FOTS nr 4902, 5028 og 7096) forventer vi små til moderate belastinger på dyrene. Vi forventer hevelse og ødemer i lysbehandlet område de første 3-6 dagene etter behandling. Bassert på resultatene fra FODS nr 4902 kan noen av de PCI behandlede dyrene(1/3 i FODS nr 4902) få små overfladiske sår i lysbehandlet område. Disse sårene er i andre modeller observert å heles innen 2 uker uten arrdannelse. Både hevelse, ødemer og sårdannelse er en naturlig konsekvens av PCI behandlingen, og observeres også i pasienter behandlet med PCI.
Dette prosjektet har potensiell svært stor nytteverdi både vitenskapelig og samfunnsmessig da det evaluerer en ny metode for kreftbehandling.
Vi ønsker å benytte inntil 750 mus (400 Atymic Nude-Foxn1nu hunn mus og 350 Balb/c).
Dette prosjektet er designet for å etterleve kravene til 3R. PCI av de aktuelle immunotoksinene blir først nøye testet og evaluert in vitro, og vi går kun videre med de prosedyrene som gir gode resultater in vitro. Ettersom dette er en behandlingsstrategi vi mener kan utvikles for behandling av menneske, er det etter in vitro evaluering viktig å gjøre forsøkene i levende dyr, for å se om behandlingen også er effektiv i et komplekst in vivo system. Antall mus i hver behandlingsgruppe er bestemt til et minimum for å gi akseptabel statistikk på bakgrunn av tilsvarende effekt studier med PCI (FODS nr 4902, 5028 og 7096). Forsøket er designet med forskjellige protokoller i forskjellige modeller, men vil initielt gjøres i 1 model og eventuelt reporoduseres i de resterende. Forsøkene gjøres initielt med A-431 eller CT26 modellen avhenging av hvilket immunotoksin som testes og reproduseres eventuelt i SCC026 og SCCO40 modellene som skisert. For studier med checkpoint inhibitorer vil MC38 modellen benyttes i tillegg til CT26. Dyrene vil bli lagt under anestesi under behandlingen og vil bli tett overvåket både før, under og etter behandling. Endepunktet (tumorvolum) er satt relativt lavt (1000 mm3) for å hindre unødvendig belasting på dyrene.