Betydning av utvalgte gener i tumorutvikling og metastatiske processer
Brystkreft er den andre mest hyppige kreftformen i kvinner med rundt 1,67 millioner nye tilfeller i 2012. Det er en kompleks kreftsykdom med veldig individuelle genetiske endringer og dermed ulik progresjon. Dødsårsaken er tett tilknyttet metastase. Tumorcellenes evne til å metastasere avhenger både av cellenes genetiske egenskaper og interaksjon med tumormiljøet. Formålet med dette forsøket er å analysere funksjonen til forskjellige gener i tumorutvikling og metastasering ved hjelp av en musebrystkreftmodell. Genene som skal undersøkes er involvert i ulike prosesser i tumorcellene, inkludert regulering av oksidativt stress, angiogenese og interaksjon mellom tumor og stromaceller. Høy ekspresjon av genene korrelerer med dårlig overlevelse i brystkreftpasienter (KM plotter og BreastMark database). Vi har derfor laget knockout/knock-down av disse genene i brystkreftcellelinjene. In vitro forsøk indikerer at KO/KD av disse genene reduserer aggressiviteten til tumorcellene og vil påvirke primærtumorvekst og evne til metastasere negativt. Denne type forsøk legger grunnlaget for forhåpentligvis ny og mer individuelt tilpasset kreftbehandling. Noe som skal redusere bivirkninger og samtidig øke pasientoverlevelse.
Begrunnelsen for å bruke en in vivo modell er at tumorutvikling og metastasering påvirkes av tumor-stroma interaksjoner, noe som ikke kan etterlignes i sin helhet i kultur. Fordi primærtumorene inneholder ikke bare tumorceller, men også andre celletyper. Tumormiljøet inneholder blant annet immunceller (makrofager og T celler) som skal bekjempe tumorceller og undertrykke tumorvekst. Imidlertid er noen kreftceller i stand til å aktivere immunceller slik at immuncellene støtte tumorveksten og metastaseringen. Lignende forsøk har blitt gjennomført tidligere, samtidig som at vi samarbeider med erfarne forskere ved NTNU. Under forsøket vil helsetilstanden til musene bli kontrollert ved hjelp av et vurderingsskjema. Tumorcellene skal injiseres i enten fat-paden eller halevenen, i noen tilfeller skal primærtumoren fjernes i en operasjon. Alle inngrep gjennomføres under bedøvelse. Etter disse inngrepene vil utseende, oppførsel, kroppsvekt, kliniske tegn og tumor størrelse blir overvåket nøye. Når musene viser tegn av ubehag og/eller nedsatt helsetilstanden blir de avlivet. Også MRI og forberedelsen til ex vivo CT skal gjennomføres under bedøvelse.
Vi har valgt ut fire gener som skal studeres i to cellelinjer ved hjelp av en rekke ulike metoder (f.eks. MRI, ex vivo CT, primærtumorutvikling og eksperimentell metastasering). Avhengig av metoden blir mellom 4-15 dyr brukt i hver gruppe, totalt 500 dyr. Vi bruker en musebrystkreftmodell som stammer fra en spontan tumor oppstått i Balb/c mus. Balb/c mus er derfor et godt modellsystem for å studere metastatiske prosesser.
Begrunnelsen for å bruke en in vivo modell er at tumorutvikling og metastasering påvirkes av tumor-stroma interaksjoner, noe som ikke kan etterlignes i sin helhet i kultur. Fordi primærtumorene inneholder ikke bare tumorceller, men også andre celletyper. Tumormiljøet inneholder blant annet immunceller (makrofager og T celler) som skal bekjempe tumorceller og undertrykke tumorvekst. Imidlertid er noen kreftceller i stand til å aktivere immunceller slik at immuncellene støtte tumorveksten og metastaseringen. Lignende forsøk har blitt gjennomført tidligere, samtidig som at vi samarbeider med erfarne forskere ved NTNU. Under forsøket vil helsetilstanden til musene bli kontrollert ved hjelp av et vurderingsskjema. Tumorcellene skal injiseres i enten fat-paden eller halevenen, i noen tilfeller skal primærtumoren fjernes i en operasjon. Alle inngrep gjennomføres under bedøvelse. Etter disse inngrepene vil utseende, oppførsel, kroppsvekt, kliniske tegn og tumor størrelse blir overvåket nøye. Når musene viser tegn av ubehag og/eller nedsatt helsetilstanden blir de avlivet. Også MRI og forberedelsen til ex vivo CT skal gjennomføres under bedøvelse.
Vi har valgt ut fire gener som skal studeres i to cellelinjer ved hjelp av en rekke ulike metoder (f.eks. MRI, ex vivo CT, primærtumorutvikling og eksperimentell metastasering). Avhengig av metoden blir mellom 4-15 dyr brukt i hver gruppe, totalt 500 dyr. Vi bruker en musebrystkreftmodell som stammer fra en spontan tumor oppstått i Balb/c mus. Balb/c mus er derfor et godt modellsystem for å studere metastatiske prosesser.